УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ХЛАМИДИОЗ

CHLAMYDIA TRACHOMATIS УСИЛИВАЕТ ПЕРСИСТЕНЦИЮ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ПОСРЕДСТВОМ МОДУЛЯЦИИ ИММУННОГО ОТВЕТА 

 Yingying Lu, Qi Wu, Li Wang and Lingting Ji. Chlamydia trachomatis enhances HPV persistence through immune modulation. Lu et al. BMC Infectious Diseases (2024) 24:229 https://doi.org/10.1186/s12879-024-09094-6

Введение.

    Рак шейки матки занимает четвертое место среди наиболее распространенных злокачественных опухолей у женщин во всем мире. В 2018 году в Китае было зарегистрировано около 106,200 новых случаев заболевания, что делает страну лидером по количеству новых случаев рака шейки матки в мире. Несмотря на значительные успехи в диагностике и лечении, заболевание продолжает оставаться серьезной проблемой общественного здравоохранения. Основным фактором риска развития рака шейки матки является персистенция вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска. Однако исследования показывают, что коинфекция Chlamydia trachomatis (CT) может значительно усиливать персистенцию ВПЧ, способствуя более быстрому прогрессированию процесса в рак шейки матки. Этот феномен особенно интересен с точки зрения эпидемиологии и иммунологии, поскольку оба патогена имеют общие пути передачи и факторы риска.

    Согласно данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), в мире ежегодно регистрируется около 290 миллионов новых случаев ВПЧ-инфекции и 131 миллиона новых случаев инфекции CT. Частота коинфекции ВПЧ и CT варьирует в зависимости от региона мира. Например, в южной части провинции Хунань в Китае уровень коинфекции составляет 1,2%, тогда как в Италии среди женщин с нормальной цитологической картиной шейки матки этот показатель достигает 2,7%.  Возможность данной коинфекции существенно зависит от баланса между микробиомом хозяина, состоянием иммунной системы и характеристиками возбудителей. Таким образом, изучение механизмов взаимодействия этих двух патогенов имеет важное значение для понимания их роли в развитии рака шейки матки.

 Методы исследования

Все участницы исследования были разделены на 4 клинических группы:

- Группа коинфекции СТ/ВПЧ (n=37);

- Группа с изолированным выявлением ВПЧ 16 генотипа (n=53);

- Группа с изолированным выявлением СТ (n=30);

- Контрольная группа здоровых женщин (n=30).

   От каждого участника были получены образцы крови, клеток экзоцервикса и биоптаты шейки матки. Генотипирование ВПЧ и скрининг CT выполнялся  методом ПЦР.

    Результаты цитологического исследования шейки матки классифицировали в соответствии с системой Bethesda 2014 года: отсутствие внутриэпителиальных поражений или злокачественных изменений (NILM), атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения (ASCUS), внутриэпителиальные поражения плоского эпителия низкой степени  (LSIL),  клетки плоского эпителия с атипией неясного значения, не исключающие внутриэпителиальные поражения плоского эпителия высокой степени  (ASC-H),   внутриэпителиальные поражения плоского эпителия высокой степени (HSIL) и плоскоклеточный рак (SCC).

 Анализ клеток Лангерганса (КЛ) и ко-стимуляторных молекул.

    КЛ выделяли из мононуклеарных клеток периферической крови (PBMCs) после инкубации в специальной среде течение 7 дней. Анализ экспрессии маркеров (MHC I, MHC II, CD40, CD80, CD83, CD86) проводили методом проточной цитометрии до и после обработки ингибитором PI3K (LY294002).

    Для оценки плотности КЛ и инфильтрации регуляторных Т-клеток использовали биоптаты шейки матки. Замороженные срезы толщиной 5 мкм после окраски  анализировали с помощью конфокальной флуоресцентной микроскопии.  Из КЛ готовили белковые экстракты и проводили иммуноблоттинг с использованием специфических  антител. Белки визуализировали с помощью усиленной хемилюминесценции и анализировали с использованием программного обеспечения Bio-Rad Quantity One.

    Способность презентации антигенов оценивали с помощью теста смешанной лимфоцитарной реакции. Для анализа субпопуляций Т-лимфоцитов - CD4⁺ и CD8⁺, апоптоза Т-лимфоцитов использовали проточная цитометрию.

  Основные результаты

  Влияние на клетки Лангерганса.

    Коинфекция CT/ВПЧ оказала значительное влияние на функциональную активность  КЛ. Уровень экспрессии MHC I, MHC II и ко-стимуляторных молекул (CD40, CD80, CD83, CD86) на КЛ был достоверно ниже при коинфекции CT/ВПЧ по сравнению с изолированной ВПЧ-инфекцией. Плотность КЛ, а также способность презентации антигенов КЛ были значительно снижены  в группе коинфекции CT/ВПЧ по сравнению с группой с изолированным выделением ВПЧ (р < 0,01 и р < 0,05, соответственно).  Эти данные свидетельствуют о том, что CT усиливает подавление функций КЛ, которые играют ключевую роль в инициации адаптивного иммунного ответа против ВПЧ.

 Активация сигнальных путей

     ВПЧ-инфекция разнонаправленно влияла на ключевые сигнальные пути, участвующие в регуляции иммунного ответа при вирусных инфекциях: активировала путь PI3K/AKT (фосфатидилинозитол3-киназа/протеинкиназа B) и подавляла путь MAPK (митоген-активируемая протеинкиназа) в КЛ. При коинфекции CT/ВПЧ эти эффекты усиливались: активация пути PI3K/AKT становилась более выраженной, а подавление пути MAPK — более глубоким. Ингибирование PI3K приводило к повышению экспрессии поверхностных маркеров и усилению иммунного ответа. Это указывает на то, что активация PI3K/AKT и подавление MAPK являются важными механизмами ускользания ВПЧ от иммунного надзора, которые усиливаются при коинфекции ВПЧ с CT.

 Изменения в популяции Т-лимфоцитов

      При коинфекции CT/ВПЧ наблюдалось снижение количества CD4+ и CD8+ Т-клеток.  Соотношение CD4+/CD8+ Т-клеток было снижено до значения <1, что указывает на угнетение клеточного иммунитета. Увеличивалась инфильтрация регуляторными Т-клетками (Tregs), которые играют роль в подавлении иммунного ответа. Усиливался апоптоз Т-лимфоцитов по сравнению с изолированной ВПЧ-инфекцией, что еще больше ослабляло клеточно-опосредованный иммунитет.

Обсуждение результатов

    Выявленные механизмы объясняют, почему коинфекция CT/ВПЧ ассоциируется с более тяжелыми предраковыми поражениями и более быстрым прогрессированием дисплазии к раку шейки матки. CT-инфекция усиливает персистенцию ВПЧ посредством нескольких механизмов:

1. Подавление функции клеток Лангерганса: снижение плотности и способности презентации антигенов КЛ, дальнейшее подавление путей MAPK и активация пути PI3K/AKT, снижение экспрессии MHC и ко-стимуляторных молекул.

2. Модуляция популяции Т-лимфоцитов: снижение количества CD4+ и CD8+ Т-клеток, снижение соотношения CD4+/CD8+ Т-клеток до значения <1, увеличение пропорции Tregs, усиление апоптоза Т-лимфоцитов.

  Полученные данные раскрывают новые механизмы ускользания ВПЧ от иммунного надзора при коинфекции с CT и указывают на важность скрининга и лечения CT-инфекции для профилактики рака шейки матки.

 Клиническое значение

      Пациенты с выявленными дисплазиями (LSIL и HSIL) встречались значительно чаще в группе коинфекции CT/ВПЧ по сравнению с группами с изолированным выявлением инфекций (p <0,05). Это подчеркивает необходимость ранней диагностики и лечения коинфекции для предотвращения прогрессирования заболевания. Кроме того, выявленные механизмы могут быть использованы для разработки новых терапевтических стратегий, направленных на восстановление иммунного ответа против ВПЧ.

 Перспективы терапии

     Ингибирование пути PI3K может рассматриваться как потенциальная терапевтическая мишень для усиления иммунного ответа против ВПЧ. Эти данные открывают новые возможности для разработки методов лечения и профилактики рака шейки матки у пациентов с коинфекцией CT/ВПЧ. Однако для внедрения таких подходов в клиническую практику требуются дополнительные исследования, включая клинические испытания.

 Заключение

   CT-инфекция усиливает персистенцию ВПЧ и прогрессирование дисплазий в рак шейки матки через комплексное подавление клеточного иммунитета. Основные механизмы включают:

1. Дисрегуляцию сигнальных путей PI3K/Akt и MAPK в КЛ.

2. Снижение числа и функциональной активности КЛ.

3. Подавление цитотоксичности CD4+ и CD8+ Т-клеток.

4. Усиление апоптоза Т-лимфоцитов.

Эти находки раскрывают новые механизмы иммунного ускользания HPV при коинфекции с CT и указывают на важность скрининга и лечения CT-инфекции для профилактики рака шейки матки.